CM Seplife® ff Агарозная хроматография смола

Агарозная хроматография смола  

CM Seplife Ff

CM SEPLIFE® FF Агарозная хроматографическая смола профиль продукта:

CM Seplife® FF Хроматографическая среда представляет собой новый тип высоко связанного агарозной хроматографической среды, независимо от Sunresin. Это слабый катион, образующийся путем соединения карбоксиметильных групп с агарозной гель -фильтрационной хроматографической средой.  Ионообменные хроматографические средства массовой информацииПолем Он обладает высокой скоростью потока, поясницей, высокой динамической нагрузкой, хорошей химической стабильностью и механическими свойствами, низкой неспецифической адсорбцией, высокой скоростью восстановления, простым в масштабе, может сократить время производства и повысить эффективность производства. Широко используется в  Очистка ионообменной хроматографии  нижестоящих белков,  нуклеиновые кислоты  и  пептиды  в  Биофармацевтические препараты и биоинженерия.

CM SEPLIFE® FF Агарозная хроматография Параметры смолы:

CM SEPLIFE® FF Агарозная хроматография

1. КОЛОМНАЯ УПАКА
Операция упаковки в соответствии со стандартными рабочими процедурами. Должно быть обеспечено, что каждый материал находится при рабочей температуре, и гель необходимо дефицит перед упаковкой.
2. Баланс
Уравновешивайте колонку с 2 до 5 раз больше объема слоя раствора для нагрузки. Убедитесь, что проводимость и рН сточных вод точно такие же, как у проводимости и рН буфера для погрузки. Раствор баланса представляет собой буферный раствор с низкой концентрацией, такой как Трис, PBS и т. Д.
3. Загрузка
(1) Образец готовит с помощью раствора баланса, а с темно -пробезом следует центрифугировать и отфильтровать перед загрузкой. Образцы со слишком большой концентрацией соли получают после обработки.
(2) Как правило, целевой продукт связан с столбцом, примеси промывают уравновешенным раствором, а затем выбирают элюент для промывания целевого продукта.
(3) Степень, в которой средние адсорбируют компоненты образца, зависит от заряженных свойств образца, ионной прочности подвижной фазы и значения pH. Концентрация соли невелика, а средняя средняя адсорбирует компоненты образца более прочно. При использовании CM -хроматографической среды рекомендуемое значение pH на 1 единица больше, чем изоэлектрическая точка целевого продукта.
4.elution
Увеличить концентрацию соли или увеличить значение pH для элюирования, обычно используемое для увеличения концентрации соли.
5. Регенерация
Как правило, сначала промывайте буфером с высокой концентрацией соли (содержащий 1 ~ 2 моль/л NaCl) или уменьшайте pH более чем в 10 раз больше объема столбца, а затем промывают до равновесия с уравновешенным раствором при связывании белка.
Если есть инактивированные белки или липиды, которые нельзя промыть во время регенерации, их можно удалить с помощью CIP.
6. Страна на месте
(1) Для белка, связанного ионной связью, его можно удалить в 0,5 ~ 1 раза больше объема слоя 2M NaCl.
(2) Для осажденных белков, гидрофобно -связанных белков или липидов, вы можете сначала промыть объем 1 -метрового слоя 0,1 М NAOH, а затем промыть раствором уравновешивания буфера, пока pH не станет нейтральным.
(3) для белков и липидов с сильным гидрофобным связыванием, промывают 4-10 раз больше объема слоя 70% этанола или 30% изопропилового спирта. Следует отметить, что концентрация органического растворителя постепенно увеличивается градиентным образом, иначе генерируются простые пузыри.
7. хранение
Запечатанный и хранить в 4 ~ 30 ℃ (раствор сохранения составляет 20% этанол) в сухом, вентилируемом, чистом месте и не может быть заморожен; Используемые столбцы хранятся в 4 ~ 8 ℃, 20% раствор этанола.
8. Транспортировка
Избегайте солнечного света, дождя и сильного давления во время транспортировки, и строго запрещено транспортировать с токсичными и вредными материалами.

CM SEPLIFE® FF Агарозная хроматография смола, вопросы, требующие внимания:

(1) Выбор столбца: Теоретически, если столбец достаточно длинная, вы можете получить идеальное разрешение, но поскольку скорость потока столбца связана с градиентом давления, увеличение длины столбца делает скорость потока медленнее, пик расширяется, а разрешение уменьшается; Диаметр колонны увеличивается, так что неравномерность потока жидкости увеличивается, а разрешение значительно уменьшается. А
(2) PH и ионная сила буфера элюирования должны строго контролироваться во время процесса очистки. Среда образца и хроматографии CM должна быть полностью уравновешена буфером элюирования перед колонкой хроматографии. А
(3) Установленная кровать столбца должна быть плоской и свободным от каналов и пузырьков, иначе его следует переустановить.
(4) Скорость потока следует строго контролировать во время элюирования и не слишком быстро.
(5) Объем образца должен быть небольшим, а концентрация не должна быть слишком высокой.
(6) Предотвратить высыхание цилиндра во время добавления образца и всего процесса элюирования.