SP Seplife® ff Агарозная хроматография смола

Агарозная хроматография смола  

SP Seplife Ff

SP Seplife® FF Агарозная хроматография профиль продукта:

SP Seplife® ff  Хроматографическая смола  новый очень сшитый  агарозная хроматография смола  независимо разработан Sunresin. Это своего рода пропил-пропил на основе сульфоновой кислоты на  агарозная гелевая фильтрационная хроматография смолаПолем Сильная катионная обменная хроматографическая смола  Благодаря высокой скорости потока, низкому обратному давлению, высокой динамической нагрузке, хорошей химической стабильности и механическим свойствам, низкой неспецифической адсорбции, высокой скоростью восстановления, удобным масштабированием, сокращением времени производства и повышением производительности. Это широко используется в  Ионообменное разделение белков,  нуклеиновые кислоты  и  пептиды  вниз по течению от  Биофармацевтические препараты и биоинженерия.

SP Seplife® FF Агарозная хроматография Параметры смолы:

SP Seplife® ff Агарозная хроматография смола Инструкция по тестированию:

1. КОЛОМНАЯ УПАКА
Упаковка выполняется в соответствии со стандартными рабочими процедурами. Должно быть обеспечено, что каждый материал находится при рабочей температуре и что гель должен быть дегассирован, прежде чем он будет упакован.
2. Ориживание
Уравновешивает столбец с 2 до 5 объемами столбца нагрузочного баланса, убедившись, что проводимость и рН сточных вод точно такие же, как у проводимости и рН буфера нагрузки.
Раствор баланса представляет собой буферный раствор с низкой концентрацией, такой как NAOAC, PBS и тому подобное. Обычно используемый раствор баланса составляет 0,1 моль/л ацетатного буфера, рН 5,0.
3. Пример загрузки
(1) Образец готовит с помощью раствора баланса, а темный образец центрифугируют и фильтруют для нагрузки. Образцы со слишком большой концентрацией соли обрабатываются, а затем распределяются.
(2) В целом целевой продукт объединяется на столбце, примеси промывают равновесным раствором, и элюент выбирается для промывания целевого продукта.
(3) Степень, в которой средняя адсорбирование составляющих образцы зависит от заряженной природы образца, ионной прочности подвижной фазы и pH. Концентрация соли невелика, а средняя адсорбирование с компонентами образца более прочно. При использовании хроматографической среды SP рекомендуемый pH составляет 1 единицу выше изоэлектрической точки целевого продукта.
4.elution
Элюция может быть выполнена путем увеличения концентрации соли или увеличения pH и, как правило, увеличивая концентрацию соли. Обычно используемый элюент (раствор B), такой как: 0,1 моль/л ацетатного буфера + 2 моль/л NaCl, pH 5,0.
5. Регенерация
Как правило, буфер промывается высокой концентрацией соли (содержащей 1 ~ 2 моль/л NaCl), или pH снижается в 10 раз или более, а затем промывают равновесным раствором связанного белка для баланса.
Если инактивированные белки или липиды не промываются во время регенерации, их можно удалить с помощью очистки на месте (CIP).
6.cip
(1) Для белков, связанных с ионной связью, его можно удалить с объемом слоя колонны от 0,5 до 1 колонны 2 М NaCl.
(2) Для осажденных белков, гидрофобно связанных белков или липидов можно сначала промыть с помощью 1 -го слоя колонны 0,1 М NaOH, а затем с равновесным буферным раствором до тех пор, пока pH не станет нейтральным.
(3) Для сильно гидрофобно связанных белков, липидов и т. Д., Промывайте с 4-10 раз больше объема слоя 70% этанола или 30% изопропанола. Обратите внимание, что концентрация органического растворителя постепенно увеличивается градиентным образом, иначе это легко создавать пузырьки.
7. хранение
Запечатанный и хранящий при 4 ~ 30 ℃ (раствор для консервации составляет 20% этанол + 0,2 моль/л ацетата натрия), сухой, вентилируемый, чистое место, не может быть заморожен;
Используемый столбец хранится при 4 ~ 8 ℃, 20% раствор этанола +0,2 моль /л ацетата натрия.

SP Seplife® ff Агарозная хроматография смола Осторожность:

(1) Выбор столбца: теоретически, если столбец достаточно длинный, идеальное разрешение может быть получено, но, поскольку скорость потока столбца связана с градиентом давления, длина столбца увеличивается, чтобы замедлить скорость потока, пик становится шире, и разрешение уменьшается; Диаметр колонны увеличивается, вызывая увеличение неоднородности потока жидкости и значительное снижение разрешения.
(2) PH и ионная сила буфера элюирования должны строго контролироваться во время процесса очистки. Колоночная хроматография должна быть выполнена после образца, а среду хроматографии SP должна быть полностью уравновешена с помощью буфера элюирования.
(3) Кровать из колонны должно быть плоским, без канавок и пузырьков воздуха, иначе его следует переупаковывать.
(4) Скорость потока должна строго контролироваться во время процесса элюирования и не слишком быстро.
(5) Объем образца должен быть небольшим, а концентрация не должна быть слишком высокой.
(6) Во время нагрузки и всего процесса элюирования поверхности цилиндра предотвращается высыхание.