Новые смолы Oligo dT для очистки и выделения мРНК: изучение новой технологии, основанной на затравленных магнитных шариках и распыляемых стироловых/ДВБ-смолах

Новая аффинная смола Sunresin Seplife®Oligo dT предназначена для очистки и выделения мРНК в производственных процессах транскрипции in vitro (IVT). Используя 20-летний опыт Sunresin в производстве специальных смол, мы разработали уникальную технологию, позволяющую производить полимерную смолу размером 50 микрон с очень однородным размером частиц за счет набухания семян. Смола представляет собой сшитую полистиролдивинилбензольную смолу, функционализированную олиго dT20. Смола эффективно захватывает мРНК от компонентов процесса реакции транскрипции, таких как ферменты и плазмидная ДНК.

Seplife® Oligo dT был разработан для удовлетворения растущих потребностей в селективности, производительности и крупномасштабной последующей очистке ряда конструкций мРНК, используемых в вакцинах, таких как вакцина мРНК COVID-19, онкологические вакцины, вакцины против СПИДа, лечение и профилактика редких заболеваний. заболевания и другие серьезные заболевания. Эта смола позволяет избирательно захватывать мРНК через полиаденилированный (полиА) хвост с использованием простой соли (0,5 М NaCl) и этапов очистки на водной основе.

Основные особенности Oligo dT сочетают в себе простоту очистки мРНК из сырой транскрипционной смеси для эффективного удаления плазмидной ДНК и других компонентов IVT, упрощенный рабочий процесс благодаря легкой адаптации к различным типам колонок и превосходную масштабируемость. Конечно, смола была разработана таким образом, чтобы показать превосходную устойчивость к температуре до 65°С и к щелочам для эффективной CIP-мойки.

Уникальная технология смол, разработанная Sunresin, позволяет производить партии смолы по 50 кг, тем самым снижая риск изменчивости и обеспечивая лучшие в своем классе производственные возможности с использованием условий GMP и строгого контроля качества.

Поверхность микросфер смолы модифицируется по запатентованной технологии, чтобы стать более гидрофильной и уменьшить неспецифическую адсорбцию. Это достигается за счет добавления лиганда, состоящего из длинноцепного спейсерного плеча, поэтому стерические препятствия уменьшаются, скорость массопереноса увеличивается и обеспечивается высокое динамическое связывание. Затем поверхность шариков функционализируется поли(dT), чтобы обеспечить захват мРНК посредством спаривания оснований с полиА-хвостом мРНК.

На этом плакате мы представляем применение очистки мРНК длиной 1200 нуклеотидов с использованием Oligo dT с использованием захвата и высвобождения в стандартных условиях очистки мРНК. Кроме того, покрытие, нанесенное на смолу, позволяет уменьшить количество плазмидной ДНК и других компонентов транскрипционной смеси.

Мы также представляем недавно разработанные магнитные смолы, функционализированные олиго-dT для легкой очистки и разделения на стадиях исследований и разработок. Эти магнитные шарики состоят из сердцевины из полистирол-дивинилбензола, изготовленного по уникальной технологии посева, которая позволяет изготавливать шарики моноразмера от 1 до 3 микрон. Затем эти шарики покрывают Fe3O4, а затем полностью покрывают полиуретановой оболочкой, которая полностью защищает шарики от высвобождения парамагнитного материала.

Эти магнитные частицы позволяют легко и быстро отделять мРНК, что ускоряет процесс разработки и скрининга новых методов генной терапии.