Seplife®6ff Fast Flow Агарозная хроматография смола
Быстрый поток агарозная хроматография смола
Seplife 6ff
Seplife®6ff Fast Flow Agarose Chromatography Cromatrography Prost Prost:
Seplife® 6ff Фагорозная хроматографическая смола агарозы образуется при сшивании на Seplife® 6B агарозная хроматография СМИПолем Его химическая стабильность и физические свойства значительно повышаются с высокими скоростями потока, высокой нагрузкой и низкой удельной адсорбцией. Он имеет высокий уровень восстановления и может быть использован много раз. Это может быть использовано для Гель фильтрационная хроматография и Очистка белков, нуклеиновые кислоты и пептиды вниз по течению от Биофармацевтические препараты и биоинженерия.
Seplife®6ff Fast Flow Agarose Chromatography Параметры смолы:
Смола код | Seplife® 6ff |
Появление | Белая сфера |
Размер частиц (мкм) | 45 ~ 165 |
Матрица | 6% сшитая агароза |
Скорость потока (см/ч) | <300 |
Давление (MPA) | 0.2 |
PH стабильность | 2 ~ 12 (длительный), 2 ~ 14 (краткосрочный, CIP) |
Приложение | Белки, нуклеиновые кислоты и пептиды ниже Биофармацевтические препараты и биоинженерия |
Химическая стабильность | Стабильный в растворе буфера воды: 2m NaOH; 70% этанол, 30% изопропанол, 30% ацетонитрил, 1% SDS, 6M гуанидин Гидрохлорид, мочевина 8 м. |
Предел исключения | 10000 ~ 4 × 106 глобулин |
Условия испытаний: Хроматография колонка 16 мм * 300 мм; Высота слоя колонки 15 см; температура 25 ℃; Подвижная фаза составляла 0,1 моль / л NaCl. |
Seplife®6ff Fast Flow Agarose Chromatography Смола Инструкция по тестированию:
1. КОЛОМНАЯ УПАКА
Упаковка выполняется в соответствии со стандартными рабочими процедурами. Должно быть обеспечено, что каждый материал находится при рабочей температуре и что гель должен быть дегассирован, прежде чем он будет упакован.
2. Ориживание
Уравновешивает столбец с 2 до 5 объемами столбца нагрузочного баланса, убедившись, что проводимость и рН сточных вод точно такие же, как у проводимости и рН буфера нагрузки.
3. Пример загрузки
(1) Образец готовит с помощью буфера, а стенавидный образец центрифугируется и фильтрован для нагрузки. Образцы с чрезмерным содержанием соли и слишком маленькой концентрацией должны быть обработаны сначала, а затем загружаться.
(2) Разделение компонентов образца средой выполняется в соответствии с молекулярной массой компонентов, и молекулярная масса сначала вытекает.
(3) Объем загрузки составляет около 1-2% от объема столбца, и чем меньше, тем лучше производительность разделения.
4.elution
Элюирование проводилось с помощью буфера, а скорость потока и буферный состав сохранялись постоянными во время элюирования.
5. Регенерация
Обычно он промывается буфером для баланса и может использоваться снова. Некоторые инактивированные белки или липиды не могут быть промыты во время регенерации и могут быть удалены с помощью очистки на месте (CIP).
6.cip
(1) Для ионного белка его можно удалить с объемом слоя колонны от 0,5 до 1 колонны 2 м.
(2) Для осажденных белков, гидрофобно -связанных белков или липидов его можно удалить с помощью 1 -го слоя колонны 0,1 М NaOH. (3) Для сильно гидрофобно связанных белков, липидов и т. Д. Его можно промыть с 4-10 объемами колонны 70% этанола или 30% изопропанола. Однако следует отметить, что концентрация органического растворителя постепенно увеличивается градиентным образом, в противном случае пузырьки легко генерируются.
После завершения очистки уравновешивают колонку не менее 3 слоя объемов уравновешивающего буфера, пока pH и проводимость не останутся неизменными.
7. хранение
Герметизированный и хранить в 4 ~ 30 ℃ (20% этанол в растворе для хранения), сухой, вентилируемый, чистый, не замороженный; Используемые столбцы хранятся в 4 ℃, 20% растворе этанола.
Seplife®6ff Fast Flow Agarose Chromatography Смола Осторожность:
(1) Объем образца должен быть сконцентрирован как можно больше перед использованием гелевой фильтрации.
(2) Образец должен быть прояснен без частиц.
(3) Чтобы получить наибольшее разрешение, объем нагрузки не может превышать 5% объема слоя.
(4) Колоночная хроматография должна выполняться после образца, а хроматографическая среда должна быть полностью уравновешена с помощью буфера элюирования.
(5) Кровать из колонны должно быть плоским, без канавков и пузырьков воздуха, иначе его следует восстановить.
(6) Чтобы защитить стабильность и активность белка, выбирается белок очистки буфера.
(7) Чтобы избежать неспецифического ионного взаимодействия между белком и средой, в буфере можно добавить до 0,15 моль/л NaCl.
(8) В соответствии с молекулярной массой целевого белка выбирается среда, ближайшая к срединному диапазону разделения.
(9) Скорость потока следует строго контролировать в процессе элюирования и не слишком быстро.
(10) Во время нагрузки и всего процесса элюирования поверхности цилиндра предотвращается высыхание.
(11) Этот продукт должен избегать контакта с окислителями агентов и избегать длительного воздействия воздуха.