Fmoc/t-Bu твердофазный синтез

Метод Fmoc — это новый метод для  твердофазный синтез пептидов  Разработано Карпино и Хартом на основе метода Бока.

Принципиальное различие между стратегией Fmoc/t-Bu(9-флуоренилметоксикарбонил/трет-бутокси) и стратегией Boc/Bzl заключается в использовании щелочно-удаляемой Fmoc-группы в качестве защитной группы для α-аминогруппы, боковая цепь защищена t-Bu, которая может быть удалена с помощью TFA, и используется твердофазный носитель — смола Ванга с кислоточувствительным связующим звеном, а заключительный этап синтеза завершается обработкой TFA. (Han Xiang et al.) Успешно синтезирован 32-пептидный тимозин α1 методом твердофазного синтеза с использованием Fm oc-Asn(Trt)-W angResin, где Boc-группа защищает боковую цепь аминогруппы лизина, а трет-бутиловый эфир (Ot-Bu) защищает боковую цепь карбоксильной группы аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты, t-Bu защищает боковую цепь гидроксильной группы серина и треонина, а тритиль (Trt) защищает боковую цепь амидной группы аспарагина. Общий выход синтеза составляет 33,2%, а чистота — >98,8%.

Аминокислота, защищенная Fmoc-группой, чувствительна к основаниям, особенно к вторичным аминам, и может быть удалена пиперидином при комнатной температуре. В этих условиях Z-, Boc- или другие аминозащитные группы остаются неизменными.

Защитная группа Fmoc устойчива к кислотам и может быть удалена в слабощелочных условиях. Она может использоваться в сочетании с кислоточувствительными защитными группами боковых цепей и обладает преимуществами мягких условий реакции, меньшего количества побочных реакций и высокого выхода. 

Очистка продукта также облегчается, когда полиарильный аналог защитной группы Fmoc присоединяется к N-концу полипептида и белка. В то же время, группа Fmoc обладает характерным поглощением ультрафиолетового излучения, что облегчает мониторинг и контроль реакции, поэтому она становится все более популярной. 

Более того, с развитием индустрии синтеза пептидов стоимость защиты аминокислотного сырья с помощью Fmoc-защиты значительно снизилась, и Fmoc-метод постепенно вытеснил Boc-метод, получив широкое распространение в твердофазном синтезе.