Сеплайф ®6FF Смола для быстрой проточной агарозной хроматографии

Быстропроточная агарозная хроматография Смола
Сеплайф 6FF
Сеплайф ®6FF Быстропроточная агарозная хроматографическая смола Профиль продукта:
Сеплайф ® 6FF быстропроточная агарозная хроматографическая смола формируется путем сшивания на Seplife ® 6Б агарозная хроматографическая среда . Его химическая стабильность и физические свойства значительно улучшаются при высоких скоростях потока, высокой загрузке и низкой удельной адсорбции. Он имеет высокую скорость восстановления и может быть использован повторно много раз. Его можно использовать для гель-фильтрационная хроматография и очистка белков , нуклеиновые кислоты и пептиды вниз по течению от биофармацевтика и биоинженерия .
Сеплайф ®6FF Быстропроточная агарозная хроматография Параметры смолы:
Код смолы | Сеплайф ® 6FF |
Появление | Бусины Белые Сферы |
Размер частиц (мм) | 45 х 165 |
Матрица | 6% сшитой агарозы |
Скорость потока (см3/ч) | |
Давление(МПа) | 0.2 |
стабильность pH | 2~12 (долгосрочно), 2~14 (краткосрочно, CIP) |
Приложение | Белки, нуклеиновые кислоты и пептиды ниже по течению
биофармацевтика и биоинженерия |
Химическая стабильность | Стабильный в водном буферном растворе:
2M NaOH; 70% этанола, 30%
изопропанол, 30% ацетонитрила, 1% SDS, 6M гуанидина гидрохлорид, 8М мочевина. |
Предел исключения | 10000~4×10&164
165& глобулин |
Условия испытаний:
Хроматографическая колонка 16 мм * 300 мм; Высота слоя колонки 15 см; температура 25°C;
Подвижная фаза – 0,1 моль/л NaCl. |
Сеплайф ®6FF Быстропроточная агарозная хроматография Смола Инструкция по тестированию:
1.Набивка колонны
Упаковка выполняется в соответствии со стандартными рабочими процедурами. Необходимо убедиться, что каждый материал находится при рабочей температуре и что гель необходимо дегазировать перед упаковкой.
2.Равновесие
Уравновесьте колонку, используя от 2 до 5 объемов колонки загрузочных весов, убедившись, что проводимость и pH элюата точно такие же, как проводимость и pH загрузочного буфера.
3. Загрузка образца
(1)Образец готовится с буфером, а мутный образец центрифугируется и фильтруется для загрузки. Образцы с избыточным содержанием соли и слишком малой концентрацией следует сначала обработать, а затем загрузить.
(2) Разделение компонентов образца средой осуществляется в соответствии с молекулярной массой компонентов, причем молекулярная масса вытекает первой.
(3) Объем загрузки составляет около 1-2% от объема колонны, и чем он меньше, тем лучше эффективность разделения.
4.Элюирование
Элюирование проводилось буфером, при этом скорость потока и состав буфера поддерживались постоянными во время элюирования.
5.Регенерация
Обычно его промывают буфером для балансировки и можно использовать снова. Некоторые инактивированные белки или липиды не могут быть смыты во время регенерации и могут быть удалены очисткой на месте (CIP).
6.CIP
(1) Для удаления ионно-связанного белка можно использовать 0,5–1 объем колонки с 2 М NaCl.
(2) Для осажденных белков, гидрофобно связанных белков или липидов его можно удалить с помощью 1 объема колонки 0,1 М NaOH. (3) Для сильно гидрофобно связанных белков, липидов и т. д. его можно промыть с помощью 4–10 объемов колонки 70% этанола или 30% изопропанола. Однако следует отметить, что концентрация органического растворителя постепенно увеличивается градиентным образом, в противном случае легко образуются пузырьки.
После завершения очистки уравновесьте колонку, используя не менее 3 объемов уравновешивающего буфера, пока pH и проводимость не останутся неизменными.
7.Хранение
Герметично и хранится при температуре 4~30°C (20% этанола в растворе для хранения), в сухом, проветриваемом, чистом, не замороженном месте; использованные колонки хранятся в 4°C, 20% растворе этанола.
Сеплайф ®6FF Быстропроточная агарозная хроматография Смола Осторожность:
(1) Перед использованием гель-фильтрации объем образца следует максимально сконцентрировать.
(2) Образец должен быть очищен от частиц.
(3) Для получения наивысшего разрешения объем загрузки не может превышать 5% от объема слоя.
(4) Колоночную хроматографию следует проводить после того, как образец и хроматографическая среда должны быть тщательно уравновешены с элюирующим буфером.
(5) Основание колонны должно быть ровным, без канавок и воздушных пузырей, в противном случае его следует собрать заново.
(6) Для защиты стабильности и активности белка выбирается буферный очищающий белок.
(7) Чтобы избежать неспецифического ионного взаимодействия между белком и средой, в буфер можно добавлять до 0,15 моль/л NaCl.
(8) В зависимости от молекулярной массы целевого белка выбирается среда, наиболее близкая к медианному диапазону разделения.
(9) Скорость потока следует строго контролировать во время процесса элюирования и не делать ее слишком быстрой.
(10)Во время загрузки и всего процесса элюирования поверхность цилиндра не подвергается высыханию.
(11) Следует избегать контакта данного продукта с окислителями и длительного воздействия воздуха.