SP Сеплайф ®Хроматографическая смола на основе агарозы FF
Агарозная хроматографическая смола
SP seplife ФФ
SP Сеплайф ® Хроматографическая смола FF Agarose Профиль продукта:
SP сеплайф ® ФФ хроматографическая смола это новый высокосшитый агарозная хроматографическая смола независимо разработанный компанией Sunresin. Это своего рода пропил на основе сульфоновой кислоты, связанный с агарозный гель-фильтрационная хроматографическая смола . Сильная катионообменная хроматографическая смола с высокой скоростью потока, низким обратным давлением, высокой динамической нагрузкой, хорошей химической стабильностью и механическими свойствами, низкой неспецифической адсорбцией, высокой скоростью восстановления, удобным масштабированием, сокращением времени производства и повышением производительности. Широко используется в ионообменное разделение белков , нуклеиновые кислоты и пептиды вниз по течению от биофармацевтика и биоинженерия .
SP Сеплайф ®Параметры хроматографической смолы FF Agarose:
| Код смолы | SP Сеплайф ® ФФ |
| Появление | Бусины Белые Сферы |
| Размер частиц (мм) | 45 х 165 |
| Матрица | Сеплайф 6FF |
| Скорость потока (см3/ч) | |
| Давление(МПа) | 0.3 |
| Теплостойкость | 121°, в воде в течение 30 минут |
| стабильность pH | 4~13 (долгосрочно), 3~14 (краткосрочно, CIP) |
| Приложение | Белки, нуклеиновые кислоты и пептиды ниже по течению
биофармацевтики и биоинженерии |
| Химическая стабильность | Стабилен в следующих жидкостях: все обычные водные буферы;
1 моль/л гидроксида натрия; 8 моль/л мочевины; 8 моль/л гидрохлорида гуанидина; 70% этанола |
| Адсорбция (мг/мл) | >55мг/мл лизоцима/мл |
| Ионообменная способность | 0,18 г/л 0,25 ммоль/мл |
| Рабочая температура. | 4~40° |
| Условия испытаний:
Хроматографическая колонка 16 мм * 300 мм; Высота слоя колонки 15 см; температура 25°C;
Подвижная фаза – 0,1 моль/л NaCl. | |
SP Сеплайф ® Хроматографическая смола на основе агарозы FF Инструкция по тестированию:
1.Набивка колонны
Упаковка выполняется в соответствии со стандартными рабочими процедурами. Необходимо убедиться, что каждый материал находится при рабочей температуре и что гель необходимо дегазировать перед упаковкой.
2.Равновесие
Уравновесьте колонку, используя от 2 до 5 объемов колонки загрузочных весов, убедившись, что проводимость и pH элюата точно такие же, как проводимость и pH загрузочного буфера.
Балансовый раствор представляет собой буферный раствор низкой концентрации, такой как NaOAC, PBS и т. п. Обычно используемый балансовый раствор представляет собой ацетатный буфер 0,1 моль/л, pH 5,0.
3. Загрузка образца
(1) Образец готовится с помощью балансировочного раствора, а мутный образец центрифугируется и фильтруется для загрузки. Образцы со слишком высокой концентрацией соли обрабатываются и затем распределяются.
(2)В общем случае целевой продукт объединяется на колонке, примеси вымываются равновесным раствором и выбирается элюент для промывки целевого продукта.
(3) Степень, в которой среда адсорбирует компоненты образца, зависит от заряженной природы образца, ионной силы подвижной фазы и pH. Концентрация соли мала, и среда адсорбирует компоненты образца более прочно. При использовании среды для хроматографии SP рекомендуемый pH составляет 1 единицу выше изоэлектрической точки целевого продукта.
4.Элюирование
Элюирование может быть осуществлено путем увеличения концентрации соли или увеличения pH, и в целом путем увеличения концентрации соли. Обычно используемый элюент (раствор B), такой как: 0,1 моль/л ацетатного буфера + 2 моль/л NaCl, pH 5,0.
5.Регенерация
Обычно буфер промывают раствором соли с высокой концентрацией (содержащим 1–2 моль/л NaCl) или снижают pH в 10 раз и более, а затем промывают равновесным раствором связанного белка для уравновешивания.
Если инактивированные белки или липиды не смываются во время регенерации, их можно удалить методом безразборной мойки (CIP).
6.CIP
(1) Для удаления белков, связанных ионной связью, можно использовать 0,5–1 объем колонки с 2 М NaCl.
(2) Для осажденных белков, гидрофобно связанных белков или липидов их можно сначала промыть 1 объемом слоя колонки 0,1 М NaOH, а затем равновесным буферным раствором до тех пор, пока pH не станет нейтральным.
(3) Для сильно гидрофобно связанных белков, липидов и т. д. промойте 4-10-кратным объемом слоя 70% этанола или 30% изопропанола. Обратите внимание, что концентрация органического растворителя постепенно увеличивается градиентным образом, в противном случае легко Образуются пузырьки.
7.Хранение
Герметично хранить при температуре 4~30°C (консервирующий раствор — 20% этанола + 0,2 моль/л ацетата натрия), в сухом, проветриваемом, чистом месте, не замораживать;
Использованную колонку хранят при температуре 4~8°С в 20% растворе этанола +0,2 моль/л ацетата натрия.
SP Сеплайф ® Хроматографическая смола на основе агарозы FF Осторожность:
(1) Выбор колонки: теоретически, если колонка достаточно длинная, можно получить идеальное разрешение, но поскольку скорость потока в колонке связана с градиентом давления, длина колонки увеличивается, замедляя скорость потока, пик становится шире, а разрешение уменьшается; диаметр колонки увеличивается, что приводит к увеличению неравномерности потока жидкости и значительному снижению разрешения.
(2)Во время процесса очистки необходимо строго контролировать pH и ионную силу буфера элюирования. Колоночную хроматографию следует проводить после образца, а среда хроматографии SP должна быть тщательно уравновешена буфером элюирования.
(3) Основание колонны должно быть ровным, без углублений и воздушных пузырей, в противном случае его следует перепаковать.
(4) Скорость потока следует строго контролировать во время процесса элюирования и не делать ее слишком быстрой.
(5)Объем образца должен быть небольшим, а концентрация не должна быть слишком высокой.
(6) Во время загрузки и всего процесса элюирования поверхность цилиндра не подвергается высыханию.
Связаться с нами
