CM Сеплайф ®Хроматографическая смола на основе агарозы FF

Агарозная хроматографическая смола  

CM seplife ФФ

CM Сеплайф ® Хроматографическая смола FF Agarose Профиль продукта:

CM сеплифайф ® Хроматографическая среда FF — это новый тип высокосшитой агарозной хроматографической среды, независимо разработанной компанией Sunresin. Это слабый катион, образованный путем связывания карбоксиметильных групп с агарозной гель-фильтрационной хроматографической средой.  Ионообменная хроматографическая среда . Он имеет высокую скорость потока, низкое противодавление, высокую динамическую нагрузку, хорошую химическую стабильность и механические свойства, низкую неспецифическую адсорбцию, высокую скорость восстановления, легко масштабируется, может сократить время производства и повысить эффективность производства. Широко используется в  очистка методом ионообменной хроматографии  нижестоящих белков,  нуклеиновые кислоты  и  пептиды  в  биофармацевтика и биоинженерия .

CM Сеплайф ®Параметры хроматографической смолы FF Agarose:

CM Сеплайф ® Инструкция по тестированию смолы для хроматографии на агарозе FF:

1.Набивка колонны
Операция упаковки в соответствии со стандартными рабочими процедурами. Необходимо убедиться, что каждый материал находится при рабочей температуре, а гель необходимо дегазировать перед упаковкой.
2.Баланс
Уравновесьте колонку с 2-5-кратным объемом слоя раствора баланса загрузки. Убедитесь, что проводимость и pH элюата точно такие же, как проводимость и pH буфера загрузки. Раствор баланса представляет собой буферный раствор низкой концентрации, такой как Tris, PBS и т. д.
3.загрузка
(1)Образец готовится с балансировочным раствором, а мутный образец следует центрифугировать и отфильтровать перед загрузкой. Образцы со слишком высокой концентрацией соли готовятся после обработки.
(2) Как правило, целевой продукт связывается с колонкой, примеси смываются уравновешивающим раствором, а затем выбирается элюент для промывки целевого продукта.
(3)Степень адсорбции компонентов образца средой зависит от заряженных свойств образца, ионной силы подвижной фазы и значения pH. Концентрация соли мала, и среда адсорбирует компоненты образца более прочно. При использовании хроматографических сред CM рекомендуемое значение pH на 1 единицу больше изоэлектрической точки целевого продукта.
4.Элюирование
Увеличение концентрации соли или увеличение значения pH для элюирования обычно используется для увеличения концентрации соли.
5.Регенерация
Обычно сначала промывают буфером с высокой концентрацией соли (содержащим 1–2 моль/л NaCl) или снижают pH более чем в 10 раз по сравнению с объемом колонки, а затем промывают до равновесия с уравновешивающим раствором при связывании белка.
Если имеются инактивированные белки или липиды, которые невозможно смыть во время регенерации, их можно удалить с помощью CIP.
6.Уборка на месте
(1) Для белка, связанного ионной связью, его можно удалить с помощью 0,5~1 объема слоя 2 М NaCl.
(2) Для осажденных белков, гидрофобно связанных белков или липидов можно сначала промыть 1 М слоем 0,1 М NaOH, а затем промыть уравновешивающим буферным раствором до тех пор, пока pH не станет нейтральным.
(3)Для белков и липидов с сильным гидрофобным связыванием промойте 4-10-кратным объемом слоя 70% этанола или 30% изопропилового спирта. Следует отметить, что концентрация органического растворителя постепенно увеличивается градиентным образом, в противном случае легко образуются пузырьки.
7.Хранение
Герметично и хранится при температуре 4~30°C (консервирующий раствор — 20% этанола) в сухом, проветриваемом, чистом месте, и не может быть заморожен; использованные колонки хранятся при температуре 4~8°C, в 20% растворе этанола.
8.Транспорт
Избегайте воздействия солнечных лучей, дождя и сильного давления во время транспортировки, а также строго запрещается перевозить вместе с токсичными и вредными материалами.

CM Сеплайф ® Хроматографическая смола FF Agarose Вопросы, требующие внимания:

(1)Выбор колонки: Теоретически, если колонка достаточно длинная, можно получить идеальное разрешение, но поскольку скорость потока в колонке связана с градиентом давления, увеличение длины колонки замедляет скорость потока, расширяет пик и снижает разрешение; диаметр колонки увеличивается, поэтому неравномерность потока жидкости увеличивается, а разрешение значительно снижается. А
(2) pH и ионная сила элюирующего буфера должны строго контролироваться в процессе очистки. Образец и среда хроматографии CM должны быть тщательно уравновешены с элюирующим буфером перед колоночной хроматографией. A
(3) Установленное основание колонны должно быть ровным и не иметь каналов и пузырьков, в противном случае его следует переустановить.
(4) Скорость потока во время элюирования должна строго контролироваться и не быть слишком высокой.
(5)Объем образца должен быть небольшим, а концентрация не должна быть слишком высокой.
(6) Не допускайте высыхания цилиндра во время добавления образца и всего процесса элюирования.