Новые смолы Oligo dT для очистки и выделения мРНК: изучение новой технологии на основе засеянных магнитных шариков и распыленных смол стирола/DVB

Новый Sunresin Seplife ®Аффинная смола Oligo dT предназначена для очистки и выделения мРНК из производственных процессов in vitro транскрипции (IVT). Используя 20-летний опыт Sunresin в производстве специальных смол, мы разработали уникальную технологию, которая производит 50-микронную полимерную смолу с очень однородными размерами частиц путем набухания семян. Смола представляет собой сшитую полистирол-дивинилбензольную смолу, функционализированную олиго dT20. Смола эффективно захватывает мРНК из компонентов процесса реакции транскрипции, таких как ферменты и плазмидная ДНК.

Сеплайф ® Oligo dT был разработан для удовлетворения растущего спроса на селективность, емкость и крупномасштабную очистку ряда конструкций мРНК, используемых в вакцинах, таких как вакцина мРНК COVID-19, онкологические вакцины, вакцины против СПИДа, лечение и профилактика редких заболеваний и других основных заболеваний. Эта смола позволяет селективно захватывать мРНК через полиаденилированный (полиА) хвост с использованием простых этапов очистки на основе соли (0,5 М NaCl) и воды.

Основные характеристики Oligo dT сочетают в себе легкую очистку мРНК из сырой транскрипционной смеси для эффективного удаления плазмидной ДНК и других компонентов IVT, упрощенный рабочий процесс благодаря легкой адаптации к различным типам колонок и превосходную масштабируемость. Конечно, смола была разработана для демонстрации превосходной стабильности к температуре до 65°C и к щелочи для эффективной CIP.

Уникальная технология производства смол, разработанная компанией Sunresin, позволяет производить партии смолы весом 50 кг, тем самым снижая риск вариабельности и обеспечивая лучшие в своем классе производственные возможности с использованием условий GMP и строгого контроля качества.

Поверхность микросфер смолы модифицирована ∥≥ с использованием запатентованной технологии — чтобы стать более гидрофильной для снижения неспецифической адсорбции. Это достигается путем добавления лиганда, изготовленного из длинноцепочечного спейсерного плеча, поэтому стерические помехи уменьшаются, скорость массопереноса увеличивается, и обеспечивается высокая динамическая связь. Затем поверхность шариков функционализируется с помощью поли(dT), чтобы обеспечить захват мРНК через спаривание оснований с полиА-хвостом мРНК.

В этом постере мы представляем приложения для очистки 1200nt мРНК с использованием Oligo dT с использованием захвата и высвобождения в стандартных условиях очистки мРНК. Кроме того, покрытие, нанесенное на смолу, позволяет уменьшить плазмидную ДНК и другие компоненты транскрипционной смеси.

Мы также представляем недавно разработанные магнитные смолы, функционализированные олиго dT для легкой очистки и разделения на этапах разработки НИОКР. Эти магнитные шарики начинаются с сердцевинной смолы полистиролдивинилбензола, изготовленной с помощью уникальной технологии затравки, которая позволяет производить моноразмерные шарики от 1 до 3 микрон. Затем эти шарики покрываются Fe3O4, а затем полностью покрываются полиуретановой оболочкой, которая полностью защищает шарики от высвобождения парамагнитного материала.

Эти магнитные частицы позволяют легко и быстро разделять мРНК, что позволяет оптимизировать процесс разработки и скрининга новых методов генной терапии.