Новые олиго-dT смолы для очистки и выделения мРНК: исследование новых технологий на основе магнитных шариков с затравкой и струйной стирол/ДВБ смол.

Новая смола Sunresin Seplife ®Олиго-dT аффинная смола предназначена для очистки и выделения мРНК из процессов транскрипции in vitro (IVT). Используя 20-летний опыт компании Sunresin в производстве специализированных смол, мы разработали уникальную технологию, позволяющую получать полимерную смолу с размером частиц 50 микрон и очень однородным размером частиц путем набухания затравки. Смола представляет собой сшитую полистирол-дивинилбензольную смолу, функционализированную олиго-dT20. Смола эффективно захватывает мРНК из компонентов процесса транскрипции, таких как ферменты и плазмидная ДНК.

Сеплиф ®Олиго-dT разработан для удовлетворения растущего спроса на селективность, производительность и крупномасштабную очистку ряда мРНК-конструкций, используемых в вакцинах, таких как мРНК-вакцина против COVID-19, онкологические вакцины, вакцины против СПИДа, препараты для лечения и профилактики редких и других серьезных заболеваний. Эта смола позволяет селективно захватывать мРНК через полиаденилированный (полиА) хвост с использованием простых этапов очистки с солью (0,5 М NaCl) и водой.

Основные особенности Oligo dT сочетают в себе простоту очистки мРНК из неочищенной транскрипционной смеси для эффективного удаления плазмидной ДНК и других компонентов IVT, упрощенный рабочий процесс благодаря легкой адаптации к различным типам колонок и отличную масштабируемость. Разумеется, смола разработана таким образом, чтобы демонстрировать превосходную стабильность при температуре до 65℃ и к щелочам для эффективной очистки методом CIP.

Уникальная технология производства смол, разработанная компанией Sunresin, позволяет производить партии смолы весом до 50 кг, что снижает риск вариативности и обеспечивает лучшие в своем классе производственные возможности при соблюдении условий GMP и строгом контроле качества.

Поверхность смоляных микросфер модифицируется с использованием запатентованной технологии, чтобы сделать её более гидрофильной и уменьшить неспецифическую адсорбцию. Это достигается добавлением лиганда, состоящего из длинноцепочечного спейсерного звена, что уменьшает стерические препятствия, увеличивает скорость массопереноса и обеспечивает высокую динамическую связывающую способность. Затем поверхность микросфер функционализируется поли(dT), что позволяет захватывать мРНК посредством комплементарного связывания с полиА-хвостом мРНК.

На этом плакате представлены примеры применения олиго-dT для очистки мРНК длиной 1200 нуклеотидов с использованием метода захвата и высвобождения в стандартных условиях очистки мРНК. Кроме того, покрытие смолы позволяет снизить содержание плазмидной ДНК и других компонентов транскрипционной смеси.

Мы также представляем недавно разработанные магнитные смолы, функционализированные олиго-dT, для облегчения очистки и разделения на этапах научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ. Эти магнитные шарики создаются на основе полистиролдивинилбензола с использованием уникальной технологии затравки, позволяющей получать монокристаллические шарики размером от 1 до 3 микрон. Затем эти шарики покрываются Fe3O4, а затем полностью покрываются полиуретановой оболочкой, которая полностью защищает шарики от высвобождения парамагнитного материала.

Эти магнитные частицы позволяют легко и быстро разделять мРНК, что значительно упрощает процесс разработки и скрининга новых методов генной терапии.